1、适宜的营养条件(充足的碳源、氮源)。
2、适宜的氧含量(好氧的要震荡培养,厌氧的要厌氧培养,兼性的可以静止培养)。
3、合适的pH值(一般指培养基的pH值)。
4、合适的环境温度(细菌37度,真菌28度)。
5、合适的接种量(一般接种量是1%)。
拓展资料:
1、微生物包括:细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体,它个体微小,与人类关系密切。涵盖了有益跟有害的众多种类,广泛涉及食品、医药、工农业、环保等诸多领域。
2、在中国大陆地区的教科书中,均将微生物划分为以下8大类:细菌、病毒、真菌、放线菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体。有些微生物是肉眼可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。还有微生物是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的"非细胞生物",但是它的生存必须依赖于活细胞。
厌氧与好氧对应,一般指生物生长发育不需要有氧气的环境条件为厌氧。呼吸以有机物为电子受体,形成供机体需要的有机物。有厌氧细菌,他们只能生活在无氧的环境中,氧对机体有毒害作用。厌氧,就是没有氧气.有厌氧细菌,他们只能生活在无氧的环境中.有种微生物只有在没有氧气的条件下才能生存,所以遇到这种微生物的时候会注明厌氧条件就是创造一个无氧环境需要的条件就是不需要氧气的环境!
厌氧处理
厌氧处理,全称“厌氧生物处理”。在缺氧条件下以厌氧微生物为主体对有机物进行生化降解的处理方法。其处理对象包括高浓度有机工业废水、城镇污水的污泥、动植物残体及粪便等。一般包括水解发酵(也称酸化)、产具体思想如下:1、假定条件:a、厌氧处理该污水过程中主要受温度、传质速率、基质浓度以及微量元素的影响;b、微量元素可以通过外界条件的干预...
三阶段:
1.水解,发酵阶段:发酵细菌,水解细菌水解有机物
2.产氢产乙酸阶段:产氢产乙酸菌,将丙酸,丁酸等脂肪酸转化为乙酸,H2/CO2
3.产甲烷阶段:产甲烷菌利用乙酸和H2,CO2产生CH4
四类群:指的是用于厌氧工艺四种类群的微生物:
发酵细菌:发酵水解
产氢产乙酸菌:将丙酸,丁酸等脂肪酸转化为乙酸,H2/CO2
产甲烷菌:利用乙酸和H2,CO2产生CH4
同型产乙酸菌:将H2和CO2合成为乙酸
一、基本原理
厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,作用也日益引起重视。培养厌氧微生物的技术关键是要使该类微生物处于除去了氧或氧化还原势低的环境中。
焦性没食子酸与碱性溶液作用后,形成碱性没食子酸盐,在此反应过程中能吸收氧气而造成厌氧环境;牛肉渣内既含有不饱和脂肪酸能吸收氧,又含有谷胱甘肽(glutathione)能形成负氧化还原电位差;厌氧罐是采用某种方法除去其中的氧,例如将镁与氧化锌制成产氢气袋,放入罐中加水反应产生氢,钯或铂是催化剂,在常温下催化氢与氧化合成水,则可除去密封的厌氧罐中的氧。
二、器材
巴氏芽孢梭菌(巴氏固氮梭状芽孢杆菌,Clostridiumpas-teurianum),荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens);
焦性没食子酸,棉花,10%NaOH,灭菌的石蜡凡士林(1∶1),牛肉,蛋白陈,葡萄糖,NaCl,肉膏蛋白胨琼脂培养基,小试管肉膏蛋白胨琼脂斜面,厌氧罐,催化剂袋,气体发生袋,指示剂袋,灭菌的带橡皮塞或螺旋帽的大试管,灭菌的玻璃板(直径比培养皿大3—4cm),灭菌的滴管,烧瓶,刀等。
三、操作步骤
1、焦性没食子酸法
(1)大管套小管法在大试管中放入少许棉花和焦性没食子酸,焦性没食子酸的用量按它在过量碱液中能每克吸收100ml空气中的氧来估计,本实验用量约0.5g。接种巴氏芽孢梭菌在小试管肉膏蛋白胨琼脂斜面上,迅速滴入10%的NaOH于大试管中,使焦性没食子酸润湿,并立即放入除掉棉塞已接种菌的小试管斜面(小试管口朝上),塞上橡皮塞或拧上螺旋帽,置30℃培养。
(2)培养皿法取玻璃板一块或用培养皿盖,铺上一薄层灭菌脱脂棉,将1g焦性没食子酸放于其上。用肉膏蛋白陈琼脂培养基倒平板,待凝固稍干燥后,在平板上一半划线接种巴氏芽孢梭菌,下一半划线接种荧光假单胞菌,并在皿底用记号笔作好标记。滴加10%NaOH溶液约2ml于焦性没食子酸上,切勿使溶液溢出棉花,立即将已接种的平板覆盖于玻璃板上或培养皿盖上,必须将脱脂棉全部罩住,焦性没食子酸反应物切勿与培养基表面接触,以溶化的石蜡凡士林液(即vaspar)密封皿底与玻璃板或皿盖的接触处。置30℃温箱培养。
2、疱肉培养基法
(1)取已除去筋膜、脂肪的牛肉500g,切成小方块,置1000ml蒸馏水中,以小火煮1小时,用纱布过滤,挤干肉汁,将肉汁保留备用。再将肉渣用绞肉机绞碎,或用刀切碎,最好使其成细粒。
(2)将保留的肉汁加蒸馏水,使总体积为2000ml,加入20g蛋白陈,2g葡萄糖,5gNaCl和绞碎的肉渣。置烧瓶中摇均匀,加热使蛋白胨溶化。
(3)取上层溶液调整pH为8.0,在烧瓶壁上用记号笔标明瓶内液体高度,1.05kg/cm2,121.3℃灭菌15分钟后补足蒸发的水量,重新调整pH为8.0,再煮沸10—20分钟,补足水量,再调整pH为7.4。
(4)把烧瓶内容物摇匀,将溶液和肉渣分装于小试管中,肉渣约用,应用无菌手续加入已灭菌的石蜡凡士林,以隔绝氧气。
(5)接种前可将上述已做好的庖肉培养基煮沸10分钟,以除去溶入的氧,如果盖有一层石蜡凡士林,需将石蜡凡士林先在火焰边微加热,使其溶化。在培养基手感不烫时按液体接种法接入巴氏芽孢梭菌,然后将接种的试管垂直,使石蜡凡士林凝固而密封培养基。再置30℃中培养。
3、厌氧罐培养法
(1)用肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平板,凝固干燥后,取两个平板,每个平板一半边划线接种巴氏芽孢梭菌,另一半边划线接种荧光假单胞菌,并标记好。取其中的一个已接种的平皿置于厌氧罐的培养皿支架上,而后放入厌氧培养罐内;另一个已接种的平皿置培养室30℃培养。
(2)剪开催化剂袋,将催化剂倒入厌氧罐盖下面的多孔催化剂盒内,拧紧催化剂盒的盒盖。
(3)剪开气体发生袋的切碎线处,并迅速将此气体发生袋置罐内金属架的夹上,再向袋中加入约10ml水。同时,由另一人配合,剪开指示剂袋,将指示条暴露,立即放进罐内。
(4)迅速盖好厌氧罐的盖,将固定梁旋紧,置30℃培养。
智立中特工作主要包括:广泛分离、收集、保藏、交换和供应各类微生物质粒菌种;保存用于专利程序的各种可培养生物材料;质粒载体类保藏技术研究;微生物分离、培养技术研究;微生物鉴定和复核技术研究;保藏菌种的资料情报收集和提供及编辑微生物菌种目录。
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